本研究目的在探討 resveratrol 與 DBM 經過甲氧基與羥基修飾後，對於誘發肺癌細胞凋亡與抑制轉移能力之影響。
在誘發肺癌細胞凋亡之實驗結果得知，resveratrol 與其甲基化衍生物中，以 3,4'',5-trimethoxystilbene (MR-3) 抑制 A549 與 CH27 細胞生長之效果最為明顯 (p< 0.05)。進一步分析細胞週期之變化後發現，使用 0-100 μM 之 MR-3 作用 24 h 後，A549 與 CH27 細胞週期會累積於 sub-G1 與 G2/M phase，並呈現劑量效應。DBM 與其衍生物對肺癌細胞生長抑制的效果則是以 1-(2-hydroxy-5-methyl- phenyl)-3-phenyl-1,3-propanedione (HMDB) > 1-(2-hydroxyphenyl)-3- phenyl-1,3-pro-panedione (HDB) > DBM。經由 Annexin V-FITC/PI 雙染試驗後顯示，DBM 與其衍生物作用下會明顯誘發 A549 與 CH27 細胞凋亡，其中 HMDB 濃度增加至 100 μM 時，約有 8 成左右的細胞發生凋亡。藉由 western blotting 與 caspase 活性測定後發現，HMDB 誘發凋亡之機制主要是透過細胞內 Bax/Bcl-2 ratio 失衡，使粒腺體膜電位降低，並於作用 6 h 後，caspase-9 與 caspase-3 蛋白質活性增加，進而造成 PARP 裂解，促使細胞走向凋亡。
在抑制人類肺腺癌 A549 細胞轉移之實驗結果顯示，MR-3 濃度增加至 10 μM 時，A549 細胞與基質間黏附力、細胞移行與侵入能力分別只有 control 組的 58%、32% 與 40%，且細胞中 MMP-2 活性也有減少的現象。經由 RT-PCR 與 gelatin zymography 評估 A549 細胞中 MMP-2 之活性與 mRNA 表現量後發現，5 μM 之 MR-3 與 A549 作用 6 h 後，細胞內 MMP-2 之 mRNA 表現開始受到抑制，作用 12 h 後細胞 MMP-2 之活性亦開始減少。而在訊息傳遞分子方面，p-p38 與 p-JNK 蛋白質表現量分別在 MR-3 作用 3 h 與 6 h 後開始明顯受到抑制，而細胞核內之轉錄因子 p65 (NF-κB 之 subunit) 以及 c-Jun、c-Fos (AP-1 之 subunit) 蛋白質含量亦會隨作用時間增加而逐漸減少。
綜合以上結果得知，resveratrol 經過甲基化後之衍生物 MR-3 會增加對肺癌 A549 與 CH27 細胞之毒性，於高濃度下 (50 μM) 能夠經由降低粒腺體膜電位而誘發肺癌細胞凋亡並使細胞週期累積於 G2/M phase，而在低濃度下 (5 μM) 可透過 JNK 與 p38 路徑來抑制 AP-1 與 NF-κB 活化，使細胞 MMP-2 之活性減少，進而降低 A549 細胞的侵入與轉移能力。
資料來源http://handle.ncl.edu.tw/11296/ndltd/60881193997350488623
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